Sắc ký hấp phụ là gì?
Sắc ký hấp phụ là loại kỹ thuật sắc ký lâu đời nhất. Nó sử dụng pha động ở dạng lỏng hoặc khí. Pha động được hấp phụ lên bề mặt của pha rắn tĩnh.
Nguyên tắc sắc ký hấp phụ
Sắc ký hấp phụ liên quan đến việc phân tách phân tích hỗn hợp hóa học dựa trên sự tương tác của chất hấp phụ với chất hấp phụ. Hỗn hợp khí hoặc chất lỏng được tách ra khi nó đi qua lớp chất hấp phụ hấp thụ các hợp chất khác nhau ở các tốc độ khác nhau.
Chất hấp phụ – Một chất thường xốp trong tự nhiên với diện tích bề mặt cao để hấp phụ các chất trên bề mặt của nó bằng lực liên phân tử được gọi là chất hấp phụ. Một số chất hấp phụ thường được sử dụng là Silica gel H, silica gel G, silica gel N, silica gel S, silica gel ngậm nước, cellulose vi tinh thể, alumina, silica gel biến tính, v.v.
Sơ đồ sắc ký hấp phụ
Quy trình sắc ký hấp phụ
Trước khi bắt đầu với sắc ký hấp phụ Thí nghiệm cho chúng ta hiểu hai loại pha và các loại lực tham gia trong quá trình tách hỗn hợp .
- Pha tĩnh – Chất hấp phụ là pha tĩnh trong sắc ký hấp phụ. Các lực tham gia giúp loại bỏ các chất hòa tan khỏi chất hấp phụ để chúng có thể di chuyển cùng với pha động.
- Pha động – Chất lỏng hoặc chất khí được sử dụng làm pha động trong sắc ký hấp phụ. Các lực tham gia giúp loại bỏ các chất hòa tan khỏi chất hấp phụ để chúng có thể di chuyển cùng với pha động. Khi một chất lỏng được sử dụng làm pha động, nó được gọi là LSC (Sắc ký lỏng-rắn). Khi một chất khí được sử dụng làm pha động, nó được gọi là GSC (Sắc ký khí-rắn).
thiết bị –
Lọ sắc ký – Lọ thủy tinh có nắp đậy. Nó giúp duy trì một môi trường thích hợp trong quá trình tách.
Bản sắc ký lớp mỏng – Bản thủy tinh Borosilicate kích thước 20 × 20 cm, 20 × 5 cm, 20 × 10.
Ống mao quản – Hỗn hợp mẫu được đưa vào TLC với sự trợ giúp của ống này.
Pha động – Lỏng hoặc khí
Pha tĩnh – Chất hấp phụ
Thí nghiệm sắc ký hấp phụ (TLC)
- Lấy lọ sắc ký khô và sạch.
- Để đảm bảo môi trường trong bình đã bão hòa hơi dung môi, người ta dùng giấy tẩm pha động dán lên thành bình.
- Thêm pha động vào bình và đóng lại.
- Duy trì trạng thái cân bằng
- Đánh dấu đường nền trên chất hấp phụ.
- Cho mẫu vào tấm TLC với sự trợ giúp của ống mao quản và để khô.
- Đặt các tấm vào lọ và đóng lại.
- Chờ cho đến khi dung môi di chuyển từ đường cơ sở.
- Lấy bản TLC ra và lau khô.
Ứng dụng sắc ký hấp phụ
- Sắc ký hấp phụ được sử dụng để tách các axit amin.
- Nó được sử dụng trong việc phân lập kháng sinh.
- Nó được sử dụng trong việc xác định carbohydrate.
- Nó được sử dụng để tách và xác định chất béo và axit béo.
- Nó được sử dụng để phân lập và xác định peptide và protein.
Các loại sắc ký hấp phụ:
- Sắc ký lớp mỏng – Đây là một kỹ thuật sắc ký trong đó pha động di chuyển trên chất hấp phụ. Chất hấp phụ là một lớp mỏng được áp dụng để hỗ trợ vững chắc cho việc tách các thành phần. Sự phân tách diễn ra thông qua sự dịch chuyển khác biệt xảy ra khi dung môi di chuyển dọc theo lớp bột trải trên các tấm thủy tinh.
- Sắc ký giấy – Đây là một kỹ thuật sử dụng các tờ hoặc dải giấy làm chất hấp phụ là pha tĩnh mà dung dịch được tạo ra để đi qua được gọi là sắc ký giấy. Bề mặt rắn của giấy là pha tĩnh và pha lỏng là pha động.
- Sắc ký cột – kỹ thuật trong đó các chất hòa tan của dung dịch được phép di chuyển xuống cột nơi các thành phần riêng lẻ được hấp phụ bởi pha tĩnh. Dựa vào ái lực với chất hấp phụ mà các cấu tử chiếm vị trí trên cột. Thành phần bị hấp phụ mạnh nhất được nhìn thấy ở đầu cột.
- Sắc ký khí-rắn – Nguyên tắc tách trong GSC là hấp phụ. Nó được sử dụng cho các chất hòa tan có độ hòa tan kém hơn trong pha tĩnh. Loại kỹ thuật sắc ký này có số lượng pha tĩnh rất hạn chế và do đó GSC không được sử dụng rộng rãi.
Bài viết liên quan
Quy tắc hoà tan: Bảng tính tan và quy luật hoà tan các nguyên tố
Độ tinh khiết và nồng độ | Cách kiểm tra độ tinh khiết của dung môi
Câu hỏi thường gặp – FAQs
Sắc ký hấp phụ hoạt động như thế nào?
Sắc ký hấp phụ liên quan đến việc tách hỗn hợp hóa học dựa trên sự tương tác của chất hấp phụ với chất hấp phụ. Trong quá trình này, hỗn hợp khí hoặc chất lỏng được tách ra trên lớp chất hấp phụ hấp phụ các hợp chất khác nhau ở các tốc độ khác nhau.
Là phân vùng TLC hoặc sắc ký hấp phụ?
TLC là một kỹ thuật sắc ký hấp phụ. Trong quá trình này, một tấm thủy tinh, nhựa hoặc lá nhôm được phủ một lớp silica gel, nhôm oxit hoặc xenlulô đóng vai trò là pha tĩnh và một dung môi hoặc hỗn hợp dung môi như ethanol và chloroform đóng vai trò là pha động.
4 loại sắc ký là gì?
4 loại sắc ký là Sắc ký lớp mỏng, Sắc ký giấy, Sắc ký cột và Sắc ký khí-rắn.
Giá trị Rf là gì?
Hệ số lưu giữ của một vật liệu cụ thể là tỷ lệ giữa khoảng cách mà điểm di chuyển phía trên gốc tọa độ với khoảng cách mà mặt dung môi di chuyển phía trên gốc tọa độ. Công thức là Rf = khoảng cách điểm di chuyển / khoảng cách dung môi di chuyển
Giá trị Rf có thể lớn hơn 1 không?
Các giá trị Rf luôn nhỏ hơn 1. Từ định nghĩa “Rf = khoảng cách điểm di chuyển/khoảng cách dung môi di chuyển”. Nếu giá trị Rf bằng 1 hoặc quá gần, điều đó có nghĩa là vết và mặt dung môi di chuyển gần nhau và do đó không đáng tin cậy. Điều này xảy ra khi dung môi rửa giải quá phân cực đối với mẫu.
nguồn: Bài viết sắc ký hấp phụ theo định nghĩa bách khoa toàn thư wikipedia
